4º Extracción "casera" del ADN

                              Materiales

-Muestra (hígados de pollo)
-Agua ( destilada o mineral
-Sal de mesa
-Bicarbonato sódico
-Detergente líquido(fairy)
-Alcohol etílico a 0 ºC
-Mortero
-Nevera
-Colador( trozo de tela)
-Vaso
-Tubo de ensayo
-Varilla fina
-Arena

                               Procedimiento

1. Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera.
• 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
• 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
• 5 g de bicarbonato sódico.
• 5 ml de detergente líquido o champú.
2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN  y cortarla.
3. Triturar la muestra con un poco de agua y arena  en el mortero. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.

       4.Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador.
       
       5.Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol etílico enfriado a 0 ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.
       
        6.Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el  alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo.


Este es el resultado:


Y estas algunas fotos que tomamos durante la práctica:

Muestra triturada





            alcohol etílico frío
  El "colador"