2ª práctica: Reconocimiento de Lípidos y Prótidos

 *Las pruebas están juntas porque las realizamos a la vez

                          Materiales:
-Tubos de ensayo
-Gradilla
-Varillas de vidrio
-Mechero
-Vasos de precipitados
-Pipetas
-Solución de NaOH al 20%
Solución de HCl concentrado
-Solución de Sudán III
-Alcohol etílico
- Solución de SO₄Cu al 1%
-NaOH al 20%
-Tinta china roja ( aunque como no teníamos, usamos colorante alimenticio rojo)
-Eter, cloroformo o acetona ( usamos la acetona)
-Aceite de oliva
-Clara de huevo o leche
-Solución de albúmina a1 1-2%

                                                Lípidos

                                                       Practica:
Saponificación:

-Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de aceite y 2 ml de NaOH al 20%.

-Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos

-Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solución de sosa

 sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior

 lipídica de aceite inalterado.

Tinción: 

-Poner en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2 ml de aceite.

-Echar a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III.

-Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja.

-Agitar ambos tubos y dejar reposar.

-Observar los resultados: en el tubo con Sudán III todo el aceite tiene que aparecer teñido, mientras

 que en el tubo con tinta, ésta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.

Solubilidad:

-Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.

-Añadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de éter u otro disolvente orgánico,

-Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.

-Observar los resultados: Se verá cómo el aceite se ha disuelto en el éter y, en cambio no lo hace en el agua y

 el aceite subirá debido a su menor densidad.

Resultados:   

Todas las pruebas salieron bien como puede observarse en las fotografías.

                                          

                             Prótidos:

Practica:

Coagulación de proteínas:

 -Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua       para obtener una mezcla espesa) o 2-3 ml de leche.

-Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3 ml de HCl concentrado y al tercero 2‑3 ml de alcohol etílico.

-Observar los resultados.

(Solamente hay fotos de las 2 ultimas muestras ya que del primer tubo de ensayo no pudimos sacar ninguna foto) 

                                                                              

                                      Cuesta un poco, pero pueden apreciarse diferentes fases en los dos tubos de ensayo

REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (REACCIÓN DE BIURET):

-Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 1-2%.

-Añadir 4-5 gotas de solución de SO₄Cu al 1%.

-Añadir 3ml de solución de NaOH al 20%.

 -Agitar para mezclar bien la muestra

 -Observar que se volverá de un tono violeta que será más intenso cuanto mayor sea la concentración de proteínas  

                                                                       

                                                                     

                                                                 Resultados:

                                        

                  Una vez más, todas las reacciones han salido como se esperaba.